domingo, 22 de agosto de 2010

tecnicas de analisis de dna

ADN PROFILING


El análisis de ADN (también llamada prueba de ADN, escribiendo ADN o huellas genéticas) es una técnica empleada por los científicos forenses para ayudar en la identificación de los individuos sobre la base de sus respectivos ADN perfiles. perfiles de ADN se cifran conjuntos de números que reflejan la persona del ADN de una maquillaje, que también puede ser utilizado como identificador de la persona. el análisis de ADN no debe confundirse con la secuenciación del genoma completo . Se utiliza, por ejemplo, pruebas de los padres y la violación de investigación .

Aunque el 99,9% de las secuencias de ADN humano son los mismos en cada persona, lo suficiente del ADN es diferente para distinguir un individuo de otro. utiliza el análisis de ADN repetitivo ("repetir") secuencias que son muy variables, llamada variable número de repeticiones en tándem (VNTR). VNTR loci son muy similares entre los humanos relacionados de cerca, pero tan variables que los individuos no relacionados son extremadamente poco probable que tenga la misma VNTR.

Los perfiles de ADN técnica fue reportada por primera vez en 1984 por Sir Alec Jeffreys en la Universidad de Leicester en Inglaterra, y ahora es la base de varias bases de datos nacional de ADN . la caracterización genética Dr. Jeffreys fue comercializada en 1987, cuando una empresa química ICI, inició un centro de sangre-prueba en Inglaterra.

análisis de RFLP



Los primeros métodos para averiguar la genética utilizada para perfiles de ADN implicadas enzimas de restricción digestión, seguida por Southern blot análisis. A pesar de polimorfismos pueden existir en la división sitios enzima de restricción, más comúnmente las enzimas y las sondas de ADN se utiliza para analizar loci VNTR. Sin embargo, la técnica de Southern blot es laborioso, y requiere grandes cantidades de ADN de muestras no degradadas. Además, la técnica original de Brown Karl miró muchas minisatélite loci, al mismo tiempo, el aumento de la variabilidad observada, pero lo que hace difícil discernir alelos individuales (y por tanto se opone a las pruebas los padres ). Estas técnicas principios han sido suplantadas por las pruebas de PCR-based.

análisis de PCR



Con la invención de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), el análisis de ADN dieron pasos de gigante, tanto en poder de discriminación y la capacidad de recuperar información desde muy pequeño (o degradado) muestras de partida. PCR amplifica considerablemente los importes de una región específica del ADN, utilizando oligonucleótidos cebadores y una ADN polimerasa termoestable . Los primeros ensayos, como el HLA - DQ alfa inversa dot blot tiras llegó a ser muy popular debido a su facilidad de uso y la rapidez con que podría ser un resultado obtenido. Sin embargo no eran tan exigentes como RFLP. También era difícil determinar un perfil de ADN de las muestras mixtas, como una esponja vaginal de una víctima de asalto sexual.

Afortunadamente, el método PCR es fácilmente adaptable para el análisis de los loci VNTR. En los Estados Unidos el FBI ha estandarizado un conjunto de 13 ensayos VNTR para la tipificación del ADN, y ha organizado el CODIS base de datos para la identificación forense en casos penales. ensayos similares, así como bases de datos se han creado en otros países. Además, los kits comerciales disponibles que analizan polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs). Estos kits utilizan la PCR para amplificar regiones específicas con variaciones conocidas y hibridan a sondas ancladas en las tarjetas, que se traduce en una mancha de color correspondiente a la variación de la secuencia en particular.

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